期刊简介
本刊为中华预防医学会系列杂志，高血压联盟（中国）学术期刊，是国内目前唯一有关高血压及相关疾病诊疗防治科研的医学专业期刊。以普及高血压防治知识，交流高血压及相关疾病的临床防治经验与科研，介绍国内外最新动态为宗旨，坚持理论与实践、提高与普及相结合，百花齐放、百家争鸣的方针。被多家权威部门收录为核心期刊，有中文核心期刊、中国科技核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国核心期刊(遴选)数据库收录期刊、中国医学核心期刊，中国学术期刊光盘版、万方数据库及有关医学数据库人编期刊、中国医学文摘内科学收录核心期刊。杂志的影响因子逐年提高，稳步排在医学类期刊前列。设有编辑部述评、专家论坛、焦点大家谈、综述、论著（包括临床医学、基础医学、预防医学内容）、讲座、读者来信、读者-作者-编者、病例分析、临床研究快讯、国内外动态等栏目。2005年第9期起增设临床经验交流栏目，欢迎踊跃投稿。
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首页>中华高血压杂志
- 杂志名称：中华高血压杂志
- 主管单位：高血压杂志；中国高血压杂志
- 主办单位：中华人民共和国卫生部
- 国际刊号：11-5540/R
- 国内刊号：11-5540/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊二等奖；中文核心期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
含人组织激肽释放酶1和基质金属蛋白酶组织抑制物1基因共表达载体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响
朱鹏立；余惠珍；黄舒洁；向红；张枫；潘玮；李峰；林帆
关键词：人组织激肽释放酶1, 人基质金属蛋白酶组织抑制物1, 重组腺病毒载体, 血管平滑肌细胞, 基因表达, 细胞增殖
摘要：背景和目的 前期研究表明人组织激肽释放酶1(hTK1)基因过表达具有部分抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和改善血管再狭窄的作用,但联合基质金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)对VSMC增殖是否具有协同效应,目前尚不明了.本研究构建含双基因hTK1和hTIMP1的重组腺病毒载体,并观察其在大鼠VSMC中的表达,以及对VSMC生长增殖影响.方法 采用限制性内切酶BglⅡ和SalⅠ,酶切含启动子CMV和hTIMP1基因片段的重组穿梭质粒,经PCR、连接、热激、转化等亚克隆至pDC316-hTK1质粒中,构建含双基因hTK1和hTIMP1的重组穿梭质粒.将骨架质粒和穿梭质粒于293A细胞包装重组腺病毒载体.感染大鼠VSMC后,采用Realtime-PCR法、Western blot法检测目的基因转录、蛋白表达.细胞计数法和四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞增殖.结果 经PCR、酶切和测序法证实,含双基因(hTK1和hTIMP1)的重组病毒穿梭质构建正确.在293A细胞中成功包装出重组腺病毒载体Ad-hTK1-hTIMP1.感染VSMC后,双基因(hTK1和hTIMP1)的转录水平表达呈现随感染复数(50～150 MOI)和时间(1～3 d)依赖性地增加,目的蛋白(hTK1和hTIMP1)亦呈现浓度依赖性地高表达.与单基因载体(Ad-hTK1或Ad-hTIMP1)相比较,双基因载体可明显抑制血小板源性生长因子(PDGF)诱导的大鼠VSMC增殖(P＜0.01),其峰值抑制率为45.7％.结论 首次成功构建并包装重组腺病毒双基因载体Ad-hTK1-hTIMP1.感染细胞后,其目的基因和蛋白均呈现独立高表达,并具有协同抑制VSMC增殖的效应,为血管增殖性疾病的多基因干预治疗实验提供一个新工具.
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